TY  - JOUR
AU  - Radmilović, Mihajlo D.
AU  - Drvenica, Ivana
AU  - Rabasović, Mihailo D.
AU  - Ilić, Vesna
AU  - Pavlović, Danica
AU  - Oasa, Sho
AU  - Vukojević, Vladana
AU  - Perić, Mina
AU  - Nikolić, Stanko N.
AU  - Krmpot, Aleksandar J.
PY  - 2023
UR  - http://rimi.imi.bg.ac.rs/handle/123456789/1324
AB  - Hemoglobin (Hb), a life-sustaining and highly abundant erythrocyte protein, is not readily fluorescent. A few studies have already reported Two-Photon Excited Fluorescence (TPEF) of Hb, however, the mechanisms through which Hb becomes fluorescent upon interaction with ultrashort laser pulses are not completely understood. Here, we characterized photophysically this interaction on Hb thin film and erythrocytes using fluorescence spectroscopy upon single-photon/two-photon absorption, and UV-VIS single-photon absorption spectroscopy. A gradual increase of the fluorescence intensity, ending up with saturation, is observed upon prolonged exposure of Hb thin layer and erythrocytes to ultrashort laser pulses at 730 nm. When compared to protoporphyrin IX (PpIX) and oxidized Hb by H2O2, TPEF spectra from a thin Hb film and erythrocytes showed good mutual agreement, broad peaking at 550 nm, supporting hemoglobin undergoes degradation and that same fluorescent specie(s) originating from the heme moiety are generated. The uniform square shaped patterns of the fluorescent photoproduct exhibited the same level of the fluorescence intensity even after 12 weeks from the formation, indicating high photoproduct stability. We finally demonstrated the full potential of the formed Hb photoproduct with TPEF scanning microscopy towards spatiotemporally controlled micropatterning in HTF and single human erythrocyte labelling and tracking in the whole blood.
T2  - International Journal of Biological Macromolecules
T2  - International Journal of Biological Macromolecules
T1  - Interactions of ultrashort laser pulses with hemoglobin: Photophysical aspects and potential applications
SP  - 125312
VL  - 244
DO  - 10.1016/j.ijbiomac.2023.125312
ER  - 

@article{
author = "Radmilović, Mihajlo D. and Drvenica, Ivana and Rabasović, Mihailo D. and Ilić, Vesna and Pavlović, Danica and Oasa, Sho and Vukojević, Vladana and Perić, Mina and Nikolić, Stanko N. and Krmpot, Aleksandar J.",
year = "2023",
abstract = "Hemoglobin (Hb), a life-sustaining and highly abundant erythrocyte protein, is not readily fluorescent. A few studies have already reported Two-Photon Excited Fluorescence (TPEF) of Hb, however, the mechanisms through which Hb becomes fluorescent upon interaction with ultrashort laser pulses are not completely understood. Here, we characterized photophysically this interaction on Hb thin film and erythrocytes using fluorescence spectroscopy upon single-photon/two-photon absorption, and UV-VIS single-photon absorption spectroscopy. A gradual increase of the fluorescence intensity, ending up with saturation, is observed upon prolonged exposure of Hb thin layer and erythrocytes to ultrashort laser pulses at 730 nm. When compared to protoporphyrin IX (PpIX) and oxidized Hb by H2O2, TPEF spectra from a thin Hb film and erythrocytes showed good mutual agreement, broad peaking at 550 nm, supporting hemoglobin undergoes degradation and that same fluorescent specie(s) originating from the heme moiety are generated. The uniform square shaped patterns of the fluorescent photoproduct exhibited the same level of the fluorescence intensity even after 12 weeks from the formation, indicating high photoproduct stability. We finally demonstrated the full potential of the formed Hb photoproduct with TPEF scanning microscopy towards spatiotemporally controlled micropatterning in HTF and single human erythrocyte labelling and tracking in the whole blood.",
journal = "International Journal of Biological Macromolecules, International Journal of Biological Macromolecules",
title = "Interactions of ultrashort laser pulses with hemoglobin: Photophysical aspects and potential applications",
pages = "125312",
volume = "244",
doi = "10.1016/j.ijbiomac.2023.125312"
}

Radmilović, M. D., Drvenica, I., Rabasović, M. D., Ilić, V., Pavlović, D., Oasa, S., Vukojević, V., Perić, M., Nikolić, S. N.,& Krmpot, A. J.. (2023). Interactions of ultrashort laser pulses with hemoglobin: Photophysical aspects and potential applications. in International Journal of Biological Macromolecules, 244, 125312.
https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2023.125312

Radmilović MD, Drvenica I, Rabasović MD, Ilić V, Pavlović D, Oasa S, Vukojević V, Perić M, Nikolić SN, Krmpot AJ. Interactions of ultrashort laser pulses with hemoglobin: Photophysical aspects and potential applications. in International Journal of Biological Macromolecules. 2023;244:125312.
doi:10.1016/j.ijbiomac.2023.125312 .

Radmilović, Mihajlo D., Drvenica, Ivana, Rabasović, Mihailo D., Ilić, Vesna, Pavlović, Danica, Oasa, Sho, Vukojević, Vladana, Perić, Mina, Nikolić, Stanko N., Krmpot, Aleksandar J., "Interactions of ultrashort laser pulses with hemoglobin: Photophysical aspects and potential applications" in International Journal of Biological Macromolecules, 244 (2023):125312,
https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2023.125312 . .

TY  - CONF
AU  - Radmilović, Mihajlo
AU  - Drvenica, Ivana
AU  - Rabasović, Mihailo
AU  - Ilić, Vesna
AU  - Pavlović, Danica
AU  - Oasa, Sho
AU  - Vukojević, Vladana
AU  - Perić, Mina
AU  - Krmpot, Aleksandar
PY  - 2022
UR  - http://rimi.imi.bg.ac.rs/handle/123456789/1439
AB  - Oslikavanje eritrocita bez obeležavanja pomoću konfokalne ili epifluorescentne mikroskopije je praktično nemoguće jer se fluorescencija od hemoglobina (Hb) ne može detektovati zbog brzih neradijativnih raspada koji su dominantni u odnosu na spontanu emisiju. Sa druge strane, demonstrirana je značajna dvofotonska apsorptivnost Hb u infracrvenoj oblasti1 kao i dvofotonski pobuđena fluorescencija (TPEF) od novoformiranog fotoprodukta2 nakon interakcije ultrakratkih laserskih impulsa sa Hb. TPEF mikroskopija je korišćena u brojnim studijama za oslikavanje Hb i eritrocita bez obeležavanja.3 U ovom radu prikazane su fotofizičke osobine i potencijalne primene novoformiranog fotoprodukta. Kreirane su fluorescentne mikrostrukture pomoću direktnog laserskog upisivanja na tankim Hb slojevima (micropatterning). Fotoprodukt je okarakterisan pomoću različitih (mikro)spektroskopskih tehnika: emisije nakon vofotonske apsorpcije, UV-VIS apsorpcije i spektralnog oslikavanja. Razmatrane su spektroskopske osobine protoporfirina IX (PpIX) pošto je on strukturni deo Hb i potencijalno može biti prekursor za formiranje fotoprodukta. Takođe, Hb je tretiran vodonik peroksidom da bi se uočila optička i spektroskopska sličnost tako dobijenog jedinjenja i fotoprodukta. Potvrđena je dugovremena fotostabilnost fotoprodukta u periodima od nekoliko meseci. Na osnovu toga što je fotoprodukt moguće dobiti na prostorno i vremenski kontrolisan način, izvršeno je fotoobeležavanje i praćenje kretanja pojedinačnih eritrocita u humanoj punoj krvi zdravog donora.
PB  - Beograd: Srpsko biološko društvo
C3  - Knjiga sažetaka: Treći Kongres biologa Srbije: Osnovna i primenjena istraživanja: Metodika nastave; 2022 Sep 21-25; Zlatibor, Srbija
T1  - Nelinearna laserska skenirajuća mikroskopija hemoglobina i eritrocita
EP  - 19
SP  - 19
UR  - https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_rimi_1439
ER  - 

@conference{
author = "Radmilović, Mihajlo and Drvenica, Ivana and Rabasović, Mihailo and Ilić, Vesna and Pavlović, Danica and Oasa, Sho and Vukojević, Vladana and Perić, Mina and Krmpot, Aleksandar",
year = "2022",
abstract = "Oslikavanje eritrocita bez obeležavanja pomoću konfokalne ili epifluorescentne mikroskopije je praktično nemoguće jer se fluorescencija od hemoglobina (Hb) ne može detektovati zbog brzih neradijativnih raspada koji su dominantni u odnosu na spontanu emisiju. Sa druge strane, demonstrirana je značajna dvofotonska apsorptivnost Hb u infracrvenoj oblasti1 kao i dvofotonski pobuđena fluorescencija (TPEF) od novoformiranog fotoprodukta2 nakon interakcije ultrakratkih laserskih impulsa sa Hb. TPEF mikroskopija je korišćena u brojnim studijama za oslikavanje Hb i eritrocita bez obeležavanja.3 U ovom radu prikazane su fotofizičke osobine i potencijalne primene novoformiranog fotoprodukta. Kreirane su fluorescentne mikrostrukture pomoću direktnog laserskog upisivanja na tankim Hb slojevima (micropatterning). Fotoprodukt je okarakterisan pomoću različitih (mikro)spektroskopskih tehnika: emisije nakon vofotonske apsorpcije, UV-VIS apsorpcije i spektralnog oslikavanja. Razmatrane su spektroskopske osobine protoporfirina IX (PpIX) pošto je on strukturni deo Hb i potencijalno može biti prekursor za formiranje fotoprodukta. Takođe, Hb je tretiran vodonik peroksidom da bi se uočila optička i spektroskopska sličnost tako dobijenog jedinjenja i fotoprodukta. Potvrđena je dugovremena fotostabilnost fotoprodukta u periodima od nekoliko meseci. Na osnovu toga što je fotoprodukt moguće dobiti na prostorno i vremenski kontrolisan način, izvršeno je fotoobeležavanje i praćenje kretanja pojedinačnih eritrocita u humanoj punoj krvi zdravog donora.",
publisher = "Beograd: Srpsko biološko društvo",
journal = "Knjiga sažetaka: Treći Kongres biologa Srbije: Osnovna i primenjena istraživanja: Metodika nastave; 2022 Sep 21-25; Zlatibor, Srbija",
title = "Nelinearna laserska skenirajuća mikroskopija hemoglobina i eritrocita",
pages = "19-19",
url = "https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_rimi_1439"
}

Radmilović, M., Drvenica, I., Rabasović, M., Ilić, V., Pavlović, D., Oasa, S., Vukojević, V., Perić, M.,& Krmpot, A.. (2022). Nelinearna laserska skenirajuća mikroskopija hemoglobina i eritrocita. in Knjiga sažetaka: Treći Kongres biologa Srbije: Osnovna i primenjena istraživanja: Metodika nastave; 2022 Sep 21-25; Zlatibor, Srbija
Beograd: Srpsko biološko društvo., 19-19.
https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_rimi_1439

Radmilović M, Drvenica I, Rabasović M, Ilić V, Pavlović D, Oasa S, Vukojević V, Perić M, Krmpot A. Nelinearna laserska skenirajuća mikroskopija hemoglobina i eritrocita. in Knjiga sažetaka: Treći Kongres biologa Srbije: Osnovna i primenjena istraživanja: Metodika nastave; 2022 Sep 21-25; Zlatibor, Srbija. 2022;:19-19.
https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_rimi_1439 .

Radmilović, Mihajlo, Drvenica, Ivana, Rabasović, Mihailo, Ilić, Vesna, Pavlović, Danica, Oasa, Sho, Vukojević, Vladana, Perić, Mina, Krmpot, Aleksandar, "Nelinearna laserska skenirajuća mikroskopija hemoglobina i eritrocita" in Knjiga sažetaka: Treći Kongres biologa Srbije: Osnovna i primenjena istraživanja: Metodika nastave; 2022 Sep 21-25; Zlatibor, Srbija (2022):19-19,
https://hdl.handle.net/21.15107/rcub_rimi_1439 .